猪附红细胞体ORF2的全基因合成、表达与鉴定
本实验通过重叠区扩增法(PCR-based accurate synthesis，PAS)，人工合成猪附红细胞体ORF2基因，并使其在大肠杆菌(DE3)中高效表达，根据GenBank注册的AJ504999的ORF2基因序列，选择大肠杆菌偏爱的密码子，设计并合成11对寡核苷酸片段，用PAS方法，人工合成ORF2基因。基因克隆入pMD18-T载体，经测序证实正确后，连接到表达载体PET-28a，获得重组表达质粒PET-28a/ORF2，导入大肠杆菌BL21(DE3)，在37℃，IPTG终浓度1mmol/L的条件下诱导表达，经SDS-PAGE分析，Western-blot鉴定，在35kDa附近出现目的片段。同时通过生物信息学软件对其蛋白二级结构及抗原表位等方面进行预测。
猪附红细胞体 ORF2 全基因合成 基因表达
周栋 成子强 刘建柱 张利 刘海涛 刘永夏 周川 柴同杰
山东农业大学动物医学院,山东 泰安 271018
国内会议
长春
中文
1196-1201
2010-08-01（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）