猪瘟病毒NS3基因克隆、原核表达及间接ELISA方法初步建立
本研究将猪瘟病毒兔化弱毒(Hog Cholera Lapinized Virus HCLV)NS3基因克隆至原核表达载体pET-32a(+)，构建成重组原核表达裁体pETNS3，在大肠杆菌Rosetta(DE3)中进行优化表达，SDS-PAGE分析重组蛋白NS3主要以包含体形式表达，分子大小约95 kD。Western Blotting分析表明重组蛋白NS3具有免疫原性。采用Ni+亲和层析方法纯化得到重组蛋白NS3(90％)。以重组蛋白NS3为抗原初步建立了检测CSFV抗体的间接ELISA方法，检测221份不同猪群和年龄猪的血清样品。检测结果与IDEXX公司CSFV-Ab检测试剂盒检测结果进行对比，阳性符合率为83.33％，阴性符合率为89.38％，总符合率为86.43％。30份存在差异的血清样品用间接免疫荧光法(Indirect ImmunofluorescenceAssay IFA)进行检测，结果显示IFA检测结果与NS3间接ELISA和IDEXX公司CSFV-Ab检测试剂盒符合率分别为56.67％和43.33％。
CSFV NS3 基因克隆 原核表达 蛋白纯化 免疫印迹 间接ELISA
蒋大良 余兴龙 李润成 葛猛 涂长春 罗维 颜爱 李杰 刘春红
湖南农业大学 动物医学院,湖南 长沙 410128 军事医学科学院 军事兽医研究所,吉林 长春 130062
国内会议
长春
中文
1208-1213
2010-08-01（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）