猪圆环病毒2型TaqMan荧光定量PCR检测方法的建立
本研究旨在建立一种针对猪圆环病毒2型特异、敏感的定量PCR方法.根据GsnBank中猪圆环病毒2型ORF 2基因序列的保守区域设计合成引物和探针,以该PMD-ORF2阳性重组质粒为标准品模板制作荧光定量PCR标准曲线.用该方法对临床采集的54份血清样品进行检测,并与常规PCR方法进行敏感性和特异性比较,结果显示:所建立的方法灵敏度可达10拷贝·μL-1,比常规PCR方法灵敏度高100倍,并且与猪细小病毒(PPV)、猪圆环病毒1型(PCV1)、猪伪狂犬病毒(PRV)、猪繁殖与呼吸综合症病毒(PRRSV)、猪瘟病毒(CSFV)没有交叉反应;田间试验表明,54份血清样品中,常规PCR结果显示,50份呈PCR阳性;而荧光定量PCR检测结果显示,52份血清为阳性;其中50份PCR阳性的样品,定量PCR均为阳性.上述结果显示该方法适合用于PCV2的流行病学调查和临床诊断.
猪圆环病毒2型 实时荧光定量PCR TaqMan探针
李文涛 李文洁 刘淑清 汪洋 杨昆 邹浩勇 何启盖
华中农业大学动物医学院 农业微生物学国家重点实验室,武汉 430070
国内会议
长春
中文
298-301
2010-08-01(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)