会议专题

针对NSP4基因的shRNA抑制牛轮状病毒的体外增殖

本研究根据牛轮状病毒(Bovino rotavirus,BRV)的NSP4基因序列,设计并构建了shRNA重组慢病毒载体RNAi-H1-89,利用脂质体介导法,将RNAi-H1-89与辅助质粒共转染293细胞,包装shRNA重组慢病毒;重组慢病毒感染MA104细胞24h后继续接种BRV,以针对LacZ基因的shRNA重组慢病毒为对照,48h后与LacZ shRNA对照比较,RNAi-H1-89明显抑制MA104细胞病变;RT-PCR检测结果表明,针对NSP4基因的shRNA可特异性抑制牛轮状病毒NSP4基因表达;病毒滴度测定表明,在转染50%、75%、95%RNAi-H1-89质粒的细胞培养上清液中,病毒滴度分别是对照组的50%、20%和1 0%.上述实验结果表明,针对NSP4基因的shRNA能高效地沉默NSP4基因,并且能阻断牛轮状病毒增殖.

轮状病毒 shRNA NSP4基因

陈方园 何洪彬 王洪梅 武建明 高运东 刘晓 杨宏军 王长法 仲跻峰 王立群

山东省农业科学院奶牛研究中心,济南 250100 东北农业大学 生命科学学院,哈尔滨 150030 山东省农业科学院奶牛研究中心,济南 250100 东北农业大学 生命科学学院,哈尔滨 150030

国内会议

中国畜牧兽医学会2010学术年会暨第二届中国兽医临床大会

长春

中文

471-475

2010-08-01(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)