SDF-1通过活化PKC-ζ趋化人表皮干细胞定向迁移的实验研究
目的:探讨信号蛋白PKC-ζ在间质细胞衍生因子1(Stromal-derived factor 1,SDF-1)趋化人表皮干细胞定向迁移中的作用及其机制。 方法:Ⅳ型胶原快速分选,无血清培养基(DK-SFM) 培养表皮干细胞,免疫组织化学染色观察表皮干细胞标志物β1整合素(β1 integrin)和角蛋白19(K19) 的表达;用transwell趋化小室观察SDF-1对Chelerythrine chloride(钙和DAG依赖性和非依赖性PKC亚型抑制剂)、Staurosporine(钙和DAG依赖性PKC亚型抑制剂)和PS-ζ(PKC-ζ特异性抑制剂)处理后人表皮干细胞的趋化作用;Western Blot方法检测SDF-1诱导后不同时段的人表皮干细胞PKC-ζ的磷酸化水平变化;采用Phalloidin-Rhodamine显示细胞骨架,激光共聚焦显微镜观察PKC-ζ抑制剂PS-ζ对人表皮干细胞极化的影响。 结果:分离培养出人表皮干细胞,免疫组织化学染色显示,细胞胞质中β1整合素及角蛋白Kl 9 均呈阳性表达。Chelerythrine chloride和PS-ζ能够抑制SDF-1趋化的表皮干细胞运动,而Staurosporine不能抑制SDF-1趋化的表皮干细胞运动;SDF-1能够引起表皮干细胞PKC-ζ的磷酸化水平增加;PS-ζ能够抑制SDF-1诱导的人表皮干细胞极化作用。 结论:信号蛋白PKC-ζ在SDF-1趋化的人表皮干细胞定向迁移中发挥重要作用。
PKC-ζ 趋化运动 人表皮干细胞 SDF-1
郭锐 李世荣 曹川 王珍祥 李喆
重庆第三军医大学西南医院整形外科医院,重庆 400038
国内会议
重庆
中文
703-705
2010-11-01(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)