骨髓间充质干细胞作为种子细胞构建电纺组织工程血管
目的：以高分子材料聚乳酸-聚己内酯(PLCL)混合纤维蛋白原电纺构建组织工程血管支架，通过铺植骨髓干细胞诱导的内皮样细胞构建具备良好远期通畅率的组织工程血管支架。 方法：以血管内皮生长因子(VEGF)定向诱导骨髓间充质干细胞分化为内皮样细胞，体外扩增培养。对诱导后的细胞进行免疫荧光鉴定。以六氟异丙醇(HFIP)为溶剂，PLCL溶解其中得到浓度为8％的溶液。纤维蛋白原溶解于六氟异丙醇和10×DMEM混合溶液中得到100mg／ml的溶液。把PLCL溶液与纤维蛋白原溶液按2：1体积进行混合，利用静电纺丝技术构建组织工程支架。采用扫描电镜(SEM)检测支架的表面纤维形态，傅里叶全反射红外光谱(ATR-FITR)进行支架表面基团分析，X射线光电子能谱(XPS)对表面元素组成进行表征，并检测了支架的力学性能。溶血试验、细胞毒性试验检测支架生物相容性。LIVE／DEADViability／Cytotoxicity kit试剂盒检测支架对BMSC诱导的内皮样细胞的粘附、增殖的影响。 结果：24h后圆形细胞贴壁，72h细胞集落形成，呈纺锤形放射状生长;7天后内皮样细胞成片生长。CD34免疫荧光鉴定阳性细胞率为83．35± 4．32％，细胞Dil-ac-LDL，FITC-UEA-1双染呈阳性，阳性率79．83％±5．47％。混纺支架纤维直径约320±56nm，ATR-FITR及XPS证实混纺支架表面有纤维蛋白原氨基酸的存在。力学性能表明PLCL能够增加混纺支架的拉伸强度及最大伸长率，改善了纤维蛋白原的力学性能。细胞毒性试验和溶血试验证明支架爱具备良好的生物相容性。细胞粘附增殖实验表明，混纺支架具有良好的细胞增殖能力，共聚焦证实在混纺支架表面，内皮样细胞生长良好，近乎铺满支架表面。 结论：PLCL与纤维蛋白原共混后行静电纺丝，能构建具有良好力学性能及生物活性的纳米组织工程支架。骨髓干细胞经VEGF诱导后可在体外分化为内皮样细胞，与PLCL／纤维蛋白原组织工程支架有良好的结合能力。
电纺丝技术 骨髓干细胞 组织工程 血管支架 合成生物材料 种子细胞
张祥满 符伟国 董智慧 方征东 何红兵 郭大乔 王玉琦
200032 上海 复旦大学附属中山医院血管外科
国内会议
第六届全国再生医学(干细胞与组织工程)学术研讨会暨第三届中华医学会医学工程学分会干细胞工程专业委员会年会
苏州
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207-214
2010-09-16（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）