苯硼酸修饰阳离子交换整体柱的制备及在蛋白质分离复性中的应用
整体柱是近年来发展迅速的一种具有传质速率快、稳定性好、制备简单等多项优点的色谱固定相。离子交换色谱(ion exchange chromatography,IEC)是生物大分子色谱分离中很重要的一类方法，比较常用的阳离子离子交换功能基有磺酸，羧酸和磷酸基团。本文首先以热引发原位聚合法合成了以甲基丙烯酸(MAA)、乙二醇二甲基丙烯酸酯(EGDMA)为基质的整体骨架，然后在其表面修饰间氨基苯硼酸(APBA)使基质表面带有负电荷从而制得阳离子交换整体柱。用该柱成功实现了对5种蛋白质的分离，并以普通流动相和氧化还原流动相分别考察了服变性、盐酸胍变性、SDS变性的RNase A在APBA柱上的重折叠行为，酶活力测试显示本文采用的蛋白折叠液相色谱法是普通稀释法复性效率的4-8倍，荧光光谱和圆二色光谱测定也证实了RNase A在APBA柱上的正确折叠。
色谱固定相 苯硼酸修饰 阳离子交换整体柱 蛋白质 分离复性 制备工艺
孙祥丽 林冬 何锡文 张玉奎 陈朗星
南开大学化学学院,天津 300071 南开大学化学学院,天津 300071 中国科学院大连化学物理研究所,大连 116023
国内会议
天津蓟县
中文
278
2010-09-24（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）