疏水色谱固定相的制备及其性能研究
本文以硅胶为基质,首先将其疏基化,然后在其表面涂敷一层甲基丙烯酸环氧丙酯(GMA),制得了带环氧基的硅胶,然后在催化剂的作用下与聚乙二醇加成制得填料,从而达到有效覆盖硅胶表面羟基的效果,既提高了硅胶的耐碱力,又避免了碱性和极性溶剂的非特异性吸附。然后检验了该填料的分离效果、动态吸附容量和温度对蛋白保留的影响,并计算了相关的热力学数据。结果表明,该硅胶涂覆高效疏水作用色谱填料的分离性能优良,基线分离六种标准蛋白,吸附容量高达36mg/g,热力学数据可以真实地反映蛋白质在HIC中的保留由熵控制。最后将该填料应用于粗胰蛋白酶的纯化,纯化后的胰蛋白酶经SDS-PAGE电泳验证其纯度高达95%以上。
疏水色谱 固定相 甲基丙烯酸环氧丙酯 非特异性吸附 粗胰蛋白酶
王芳焕 龚波林
宁夏大学能源化工重点实验室,银川 750021
国内会议
兰州
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2010-06-01(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)