曲霉生物膜对常用抗真菌药物的敏感性测定及其耐药的分子机制初探
目的：探讨曲霉生物膜对常用抗真菌药物的敏感性及其耐药的分子机制。 方法：利用微量液基稀释法测定22株曲霉游离孢子对两性霉素B、卡泊芬净和伏立康唑的敏感性;同时建立22株曲霉生物膜的体外模型，用抗真菌药物敏感试验联合甲基四氮盐(XTT)减低法来评价曲霉生物膜对两性霉素B、卡泊芬净和伏立康唑的敏感性;并进一步通过Real-Time RT-PCR测定烟曲霉生物膜形成过程中药物外排泵基因及唑类药物靶酶基因的相对表达量。 结果：对于曲霉的游离孢子，两性霉素B的MIC范围是0.5～2μg/ml，卡泊芬净的MEC范围是0.125～0.25μg/ml，伏立康唑的MIC范围是0.5～1μg/ml;对于曲霉生物膜，两性霉素B的SMIC50和SMIC80范围分別是2～＞32μg/ml和8～＞32μg/ml，卡泊芬净的SMIC50和SMIC80范围分别是32～＞256μg/ml和256～＞256μg/ml，伏立康唑的SMIC50和SMIC80范围分別是4～＞256μg/ml和32～＞256μg/ml。烟曲霉生物膜形成过程中药物外排泵基因及唑类药物靶酶基因相对表达量测定显示，与Oh相比，7个待测基因在4h时表达量没有变化;8h时AfuMDR1，CYP51A，CYP51B表达量升高，CYP51A表达量升高的最明显;12h，16h，24h时AfuMDR1，AfuMDR2，AfuMDR4，CYP51A，CYP51B表达量升高，其中CYP51A表达量升高的最明显;AfuMDR3和atrF在生物膜形成过程中表达量没有明显变化。 结论：与游离的孢子相比，曲霉生物膜对两性霉素B、卡泊芬净和伏立康唑的敏感性明显下降;烟曲霉形成生物膜以后，药物外排泵基因和唑类靶酶基因的表达量升高，可能与烟曲霉生物膜对药物敏感性降低密切相关。
病原真菌 曲霉孢子 菌株耐药 基因表达
刘伟 李丽娟 陈伟 许辉 万喆 李若瑜
北京大学第一医院皮肤性病科真菌室，北京大学真菌和真菌病研究中心 北京 100034
国内会议
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210-219
2010-09-04（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）