利用微球捕获技术检测血小板微粒的方法建立及其评价
目的：建立利用微球捕获技术检测血小板微粒(platelet derivedmicroparticles,PMP)的方法并对其进行初步的方法学评价. 方法：采用包被针对血小板膜糖蛋白Ⅲa(CD61)单克隆抗体的检测微球捕获PMP，用CD41 PE结合捕获的PMP,利用流式细胞仪对微球-PMP-CD41 PE复合物进行检测.通过试验优化检测条件;并对方法的重复性和检测线性进行评价.对45例健康人PMP水平进行检测. 结果：检测微球在4℃可以稳定保存90d以上，变异系数0.65％，基本可以满足临床检测的要求.应用CTAD抗凝管采集标本可以有效的抑制PMP的体外释放;室温孵育4h可以达到PMP最大的结合;利用PBS洗涤可以去除检测微球对PMP的非特异性吸附.该方法批内变异系数6.8％;批间变异系数10.4％，有较好的重复性;利用该方法检测血小板活化上清中的PMP。在0～200μ1之间有较好的线性(r=0.9962).45例正常健康成人血液PMP参考范围为1.031～1.766(相对荧光强度). 结论：利用微球捕获技术可以简便、快捷、准确地检测PMP,对于临床出血、血栓性疾病的诊治具有重要意义.
血小板微粒 微球捕获技术 方法学评价 单克隆抗体 膜糖蛋白Ⅲa 血栓性疾病
李传保 吴煦 袁家颖 汪润 屈晨雪 王建中
卫生部北京医院检验科 100730 北京大学第一医院检验科 100034
国内会议
武汉
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69-74
2006-05-01（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）