棉花ISSR-PCR反应体系的正交设计优化

摘要：

采用正交试验设计的方法，建立了棉花ISSR-PCR分析的优化反应体系。试验结果表明在20μL体系中，DNA浓度为60 ng、ddH2O7.4 μL、Buffer 2 μL、Taq酶1.0U、MgCl23.0 mmol·L-1、dNTPs 3.0 mmol·L-1、引物1.5 μmol·L-1为最佳体系；最佳反应条件为第一步为94℃变性3 min，第二步为94℃变性1 min，51℃退火40 s，72℃延伸90 s，45个循环，第三步为72℃延伸7 min，4℃保存。

关键词： 正交设计 ISSR-PCR分析 反应条件 棉花体系

作者: 刘朝辉 曾华兰 张骞方 叶鹏盛 韦树谷 何炼 李琼英

作者单位: 四川省农业科学院经济作物育种栽培研究所，四川简阳 641400

会议类型: 国内会议

会议名称: 中国棉花学会2010年年会

会议地点: 延吉

会议语种:中文

页码: 133-137

在线出版日期: 2010-08-01（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）