西农萨能羊脂肪酸合酶基因乙酰/丙二酸单酰基转移酶区域重组腺病毒载体的构建
研究旨在通过构建西农萨能羊脂肪酸合酶(FAS)基因乙酰/丙二酸单酰基转移酶(MAT)区域的重组腺病毒栽体。为下一步其在奶山羊乳腺上皮细胞中过表达，进一步研究MAT的功能和作用机制做准备。根据GeneBank收录的西农萨能羊MAT序列设计引物，PCR扩增并克隆测序。连接到穿梭栽体pAdTrack/CMV上并线性化后，转化含有腺病毒骨架载体pAdEasy1的E.Coli Bj5183感受态细胞进行同源重组，并用Pac Ⅰ酶切鉴定。提取质粒后转化E.coli Top10进行扩繁。将本次克隆的MAT序列与GeneBank收录的序列相比对，在601 bp处，碱基由G转变为A，导致氨基酸序列由Ala201转变为Thr201。经鉴定并测序分析。试验成功构建MAT基因的重组腺病毒表达栽体，可用于下一步病毒包装。
西农萨能羊 脂肪酸合酶 乙酰转移酶 丙二酸单酰基转移酶 腺病毒栽体 MAT序列
朱江江 罗军 赵旺生 王伟 石恒波 李君
西北农林科技大学动物科技学院，陕西杨凌 712100
国内会议
银川
中文
218-219
2010-07-25（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）