检测猪圆环病毒2抗体的双抗原夹心DELISA方法建立
根据GenBank中猪圆环病毒2(Porcine circovirus type 2，PCV2)序列(AY943819)，设计1对引物，并以包含PCV2-Cap基因的重组质pUC57-ORF2为模板，扩增出不含核定位信号序列的Cap基因，PCR产物经EcoRⅠ和SalⅠ双酶切，回收目的基因△ORF2，将其插入pET32-a(+)EcoRⅠ和SalⅠ位点之间，构建原核表达质粒pET32a-△ORF2。以原核表达的方式获得PCV2的重组Cap蛋白，以此重组蛋白作为包被抗原，并以辣根过氧化物酶(HRP)标记重组蛋白制备成酶标记抗原，建立检测PCV2抗体的双抗原夹心ELISA法(DS-ELISA)。随机抽取临床血清标本94份，分别用此方法和西班牙INGENASA公司试剂盒检测，比较两者检测结果的一致性。结果表明两者的阳性符合率100”％”、阴性符合率95.65”％”、总符合率97.87”％”。所建立的DS-ELISA方法具敏感性高、特异性强的特点，适于猪群PCV2抗体水平监测和流行病学调查。
猪圆环病毒 PCV2抗体 重组Cap蛋白 双抗原夹心ELISA法
葛猛 余兴龙 李杰 李润成 蒋大良 罗维
湖南农业大学动物医学院 长沙 410128
国内会议
长沙
中文
47-52
2009-11-01（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）