抗菌肽Dermadistinctin基因家族串联体的构建及抗菌活性检测
本文根据GenBank中的Dermadistinctin K(DDK)，Dermadistinctin L(DDL)的氨基酸序列，选择大肠杆菌偏好密码子，采用重叠延伸法(SOE)合成了抗菌肽DDK，DDL基因。在DDK，DDL中引入肠激酶裂解位点，并将其依次克隆入PET32a质粒，构建串联体融合表达载体P-DDKL，并转入Rosetta(DE3)中进行融合表达。在加入IPTG终浓度0.1mM诱导4h可达到最大表达量。命名为DDKL的重组蛋白表达产物经镍离子亲和层析柱纯化以及肠激酶裂解之后，对其进行抗菌活性分析。 结果证实抗菌肽DDK，DDL混剂对金黄色葡萄球菌(CowanⅠ)、E.coli DH5α、致病性E.coli O1、猪霍乱沙门氏菌、多杀性巴氏杆菌为代表的革兰氏阳性菌和阴性菌均显示出较好的抑菌杀菌活性。且在-7℃～100℃温度范围处理30 min，或pH3～pH10条件下处理仍具有抗菌活性。
抗菌肽 Dermadistinctin基因 串联体 融合表达 抗菌活性检测 重叠延伸法
卢帅 黎满香 刘珂 颜运秋
湖南农业大学动物医学院 长沙 410128
国内会议
长沙
中文
211-217
2009-11-01（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）