猪传染性胃肠炎病毒N蛋白基因的克隆、序列分析及其在大肠杆菌中的表达

摘要：

以本实验室从河北分离到的TGEV毒株，采用RT-PCR技术扩增了TGEVN基因，长为1149bp，并进行亚克隆重组到PMD18-T质粒载体上，连接、转化、鉴定后得到阳性重组质粒，命名为pTN，将重组质粒插入的片段进行序列分析和比较，结果表明TGEV河北分离株N基因与国外的Purdue-115、FS772/70/TO14、96-1933株均具有较高的同源性，达95％以上。并将目的基因与原核表达载体pGEX-4T-3重组，成功构建了原核表达载体pGEX-N。重组质粒转化至宿主菌BL21中，用IPTG诱导表达，对表达的蛋白用SDS-PAGE电泳、免疫印迹和薄层凝胶扫描分析。结果表明，表达产物与理论推测的分子量一致；表达蛋白约占菌体蛋白总量的22％；免疫印迹结果证明，表达的N蛋白可被TGEV阳性血清所识别。

关键词： 猪传染性胃肠炎病毒 N基因 分子克隆 载体构建 原核表达 免疫印迹

作者: 翁崇鹏 张莉 毛娅卿 张培君 陈小玲

作者单位: 北京市农科院畜牧兽医研究所 100089

会议类型: 国内会议

会议名称: 北京畜牧兽医学会成立五十周年庆典暨北京畜牧兽医学会第八届会员代表大会学术研讨会

会议地点: 北京

会议语种:中文

页码: 28-30

在线出版日期: 2004-11-01（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）