聚球藻PEPC基因的正反向表达对脂类合成的调控
聚球藻(Synechococcus)是至今所知长得最快的蓝藻。日本学者已能使这种藻细胞加倍时间缩短到1小时左右.赶上了大肠杆菌的生长速率。本研究选了实验室常用的聚球藻79420为了促进脂类合成，作者选择的技术路线是用反义抑制磷酸烯醇式丙酮酸梭化酶(PEPC)基因的表达。为了设计引物克隆基因，先用生物信息学方法分析了40种蓝藻的PEPC同源序列。还与大肠杆菌、真核藻和高等植物作了比较。这样找到了合适的保守序列，请公司合成后，用PCR技术以念珠藻7120基因组DNA为模板，克隆PEPC基因。这基因连接在pRL-489质粒上构建成正义和反义两种载体。在大肠杆菌中扩增后，转入聚球藻79420经过抗生素筛选后测定正向表达和反向表达的结果。测定结果表明反义PEPC聚球藻的PEPC活性降低了81.9”％”。脂类合成增加了42.9”％”；正义PEPC聚球藻的PEPC活性增加了46”％”，脂类合成降低了30.8”％”。这两种转基因聚球藻的生长略低于野生型细胞。
聚球藻 PEPC基因 正向表达 反向表达 脂类合成
侯李君 施定基 王学魁
天津科技大学海洋科学与工程学院 天津 300457 天津科技大学海洋科学与工程学院 天津 300457 中国科学院植物研究所 北京 100093
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2009-11-15（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）