一种高效体外扩增恶性肿瘤患者外周血淋巴细胞的方法
目的：探索从恶性肿瘤患者外周血单个核细胞(PBMCs)中高效扩增淋巴细胞的方法。 方法：取3例恶性肿瘤患者的PBMCs，每例患者重复3次，在GMP实验室体系下，经淋巴细胞刺激因子体外诱导扩增淋巴细胞，观察淋巴细胞体外扩增情况，应用流式细胞仪分析扩增前后总CD3+、CD3+CD4+、CD3+CD8+淋巴细胞、CD3-CD16+56+(NK细胞)、CD3+CD16+56+(NKT细胞)以及CD4+和CD8+T细胞比值的变化，分析培养前后各淋巴细胞亚群的扩增情况，观察培养扩增的重复性，同时初步观察淋巴细胞体外扩增培养后回输患者的生物安全性。 结果：CD3+、CD3+CD8+、CD3+CD16+56+细胞比例较培养前明显增加(P<0.01)，而CD3+CD4+、CD3-CD16+56+细胞比例、CD4+和CD8+T细胞比值则明显的降低(P<0.01)。CD3+、CD3+CD8+、CD3+CD16+56+细胞增殖倍数的中位数分别为487.9、832.5和2540.6;CD3+CD4+和CD3-CD16+56+细胞增殖倍数的中位数分别为159.6和155.5。细胞体外扩增培养前后亚型和扩增倍数的重复性较差，在本研究中只有CD3+T细胞在体外培养前后、CD3+CD16+56+细胞在培养后的CV值在10％以内。培养扩增后淋巴细胞细菌、真菌、支原体、外来病毒及内毒素检查后无阳性发现，所有患者细胞回输治疗后无明显的毒副反应。 结论：在本研究体系下体外诱导扩增培养肿瘤患者自体外周血NK细胞及致敏淋巴细胞效率较高，细胞毒性细胞比例增高较大，具有良好的生物安全性，为恶性肿瘤患者应用NK细胞进行过继免疫治疗提供了一种简单有效的扩增NK细胞的方法。
恶性肿瘤 过继免疫治疗 外周血淋巴细胞 体外扩增 生物安全性
张国庆 焦顺昌 林星石
中国人民解放军总医院肿瘤科，北京 100855
国内会议
2007亚太国际肿瘤生物学和医学学术会议暨首届解放军总医院肿瘤综合防治高峰论坛及第二届中国中青年肿瘤专家论坛
北京
中文
41-46
2007-09-15（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）