西农萨能羊BTN基因RNA干扰序列筛选及重组腺病毒载体构建与鉴定
嗜乳脂蛋白(BTN)作为乳腺特异表达蛋白，是一种带有胞质C-端尾巴的跨膜糖蛋白，集中分布在乳腺上皮细胞顶层质膜。BTN仅在泌乳期乳腺中特异表达，而且受乳腺不同的生理阶段影响。在牛及小鼠上的研究已发现，BTN基因表达从妊娠后期开始，随着泌乳的终止而停止表达。腺病毒载体作为目前转基因效率最高的载体之一，主要优点有:病毒颗粒稳定，病毒基因组不整合入宿主细胞的基因组，无插入突变的危险；可获得高滴度病毒:对多数组织、细胞均有感染性，宿主范围广，感染性强。而且腺病毒可以在哺乳动物细胞发生位点特异性重组，可以最大程度的减少病毒整合带来的基因突变效应:同时腺病毒载体介导的转染效率明显高于质粒DNA直接注射，可实现长时间的靶基因沉默。本研究采用Invitrogen公司的腺病毒RNA干扰系统，通过筛选有效的干扰序列与腺病毒骨架重组后制备表达干扰BTN基因shRNA的腺病毒，为在山羊乳腺上皮细胞进行BTN基因的功能研究奠定基础。
嗜乳脂蛋白 RNA干扰 腺病毒载体 山羊 乳腺上皮细胞
赵旺生 罗军 王伟 张晓 李建华
西北农林科技大学动物科技学院，陕西杨凌 712100
国内会议
陕西杨凌
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2009-10-10（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）