利用SIgA-ELISA建立猪肺炎支原体感染的检测方法
为更准确对猪肺炎支原体(Mhp)感染及免疫状况进行检测，本文以猪鼻拭子为检测样品，利用猪肺炎支原体粘附因子P97R1原核表达蛋白作为包被抗原;以羊抗猪IgA为二抗，兔抗猪IgG-HRP作为酶标三抗，建立Mhp SIgA间接ELISA检测方法(SIgA—ELISA)。通过对包被抗原的浓度，样品的孵育时间，封闭液，二抗与三抗的最佳稀释度和作用时间以及显色液的作用时间进行优化，摸索该方法的最佳反应条件。根据对260份Mhp SIgA阴阳性标准品的检测结果，利用Medcalcl软件确定了SIgA—ELISA检测方法的cut—off值.并将该方法与Mhp套式PCR检测方法以及商品化的Mhp抗体ELISA检测试剂盒(IgG-ELISA)进行平行比较，结果发现SIgA—ELISA方法对Mhp感染检测具有很高的敏感性(97.0％)、特异性(94.4％)与准确性(95.8％);且SIgA-ELISA方法与IgG-ELISA方法相比，能有效区分Mhp的感染与免疫.
猪肺炎支原体感染 检测方法 免疫状况
冯志新 逯晓敏 刘茂军 吴叙苏 甘源 邵国青
江苏省农业科学院兽医研究所农业部动物疫病诊断与免疫重点开放实验室 国家兽用生物制品工程技术研究中心 江苏南京 210014 江苏省农业科学院兽医研究所农业部动物疫病诊断与免疫重点开放实验室 国家兽用生物制品工程技术研究中心 江苏南京 210014 山西农业大学动物科技学院 山西太谷030801
国内会议
石家庄
中文
374-380
2009-10-01（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）