食物中毒性弧菌三联融合毒素基因克隆与表达
本研究采用柔性Linker(GGGGS)和重叠延伸PCR方法将三个毒素基因，即副溶血弧菌的耐热型直接溶血素基因tdh、创伤弧菌的溶细胞毒素基因vvhA和拟态弧菌的热不稳定型溶血素基因vmhA的成熟蛋白基因片段进行串联，得到三联融合毒素基因tdh-vvhA-vmhA(命名为F7)。一致性比对分析与预计融合的基因序列一致性为99.6％.FT的开放阅读框架全长3225 bp，编码1074个氨基酸残基，预测分子量为120.4kDa。将，7亚克隆至表达载体pET-22b(+)中，转化至E.coli BL21(DE3)中进行表达，经SDS-PAEG分析，融合蛋白分子量与预测的相符.终浓度为1mmol/L的IPTG，37℃诱导4 h，融合毒素蛋白表达量最高，经薄层扫描分析，此时融合毒素蛋白占全菌体蛋白的11.49％.三联融合毒素基因的成功克隆与表达，为进一步建立多种食物中毒性弧菌广谱、快速、特异的同步免疫学检测方法奠定基础.
食物中毒 弧菌 融合毒素 串联基因 蛋白表达 免疫学检测
李月婷 卢士英 周玉 饶星 霍方珍 任洪林 柳增善
吉林大学人兽共患病研究所畜牧兽医学院人兽共患病研究教育部重点实验室 吉林长春 130062
国内会议
石家庄
中文
387-394
2009-10-01（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）