刚地弓形虫Peroxiredoxin基因的克隆表达与免疫原性分析
目的：对刚地弓形虫Peroxiredoxin(TgPrx)基因进行克隆、表达和免疫原性分析。 方法：收集、纯化RH株弓形虫速殖子，提取总RNA;设计合成引物并引入EcoRI和Xhol酶切位点，RT-PCR扩增编码TgPrx的基因片段克隆到原核质粒pET30a(+)中，经双酶切、PCR及测序鉴定阳性克隆;在大肠杆菌BL21/DE3中用IFTG诱导表达，表达产物经SDS-PAGE进行鉴定，重组蛋白用Western blotting分析其免疫原性。 结果：从弓形虫RH株eDNA中扩增出591bp的TgPrx基因片段，并成功构建重组质粒pET30a(+)/TgPrx;SDS-PAGE结果表明，目的基因在大肠杆菌BL21/DE3中高效表达。重组蛋白的相对分子量约32kDa，Western blotting显示其能被兔抗弓形虫免疫血清识别。 结论：RH株刚地弓形虫Peroxiredoxin可在原核表达系统中高效表达，该重组蛋白具有免疫原性，有望作为弓形虫疫苗的候选抗原。
刚地弓形虫 原核表达 免疫原性 免疫血清识别 疫苗
刘转转 王海龙 殷国荣 马广源 张建中 凡振伟
山西医科大学医学寄生虫学研究所、寄生虫学教研室，太原 030001 中国疾病预防控制中心传染病预防控制所，昌平 102206 山西医科大学第一临床医学院，太原 030001
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65-68
2009-08-01（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）