Apo-tPA融合蛋白在鸡胚肝细胞中的分泌表达及其活性检测

摘要：

探讨Apo介导的t-PA融合蛋白在鸡胚肝细胞中分泌表达的可行性和生物学活性。将编码人组织型纤溶酶原激活剂功能区的基因片段△t-PA与鸡VLDLy组装前体apo-B1OO进行融合,定向克隆到pCDNA3表达载体CMV启动子下游,构建pCDNA3-Apo-△tPA表达载体。将pCDNA3-Apo-△tPA以脂质体包裹后转入体外培养的鸡胚肝细胞,ELISA法检测融合蛋白表达水平,发色底物法检测表达产物生物学活性。结果显示,融合基因在鸡胚肝细胞中能有效表达并能够分泌到细胞外,48h表达水平最高达675.3ng/106 cells/24h,表达产物活性达135.8IU/106cells/24h。apo-B1OO介导的t-PA在鸡胚肝细胞中成功表达,为外源基因在鸡体内表达并实现在卵黄中积淀奠定了坚实的基础。

关键词： 人组织型纤溶酶原激活剂 鸡胚肝细胞 活性检测 蛋白表达 发色底物法

作者: 冯运巩 李银聚 程相朝 郁川 王学强 张旭 张鹏

作者单位: 河南科技大学,动物科技学院,河南,洛阳 471003

会议类型: 国内会议

会议名称: 中国畜牧兽医学会兽医病理学分会第十六次、中国病理生理学会动物病理生理专业委员会第十五次学术研讨会

会议地点: 山东泰安

会议语种:中文

页码: 195-198

在线出版日期: 2009-07-01（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）