羊传染性脓疱病毒长春分离株的分离鉴定及其B2L、F1L基因DNA疫苗表达载体的构建

摘要：

通过病理组织学观察、免疫组化、间接免疫荧光(IFA)、病毒分离、电镜观察、PCR等方法对长春市某羊场3～6月龄羔羊出现“口疮”症状的病因进行研究分析,经系统鉴定后,证实该病毒株为羊传染性脓疱病毒(Orfvims,ORFV),命名为ORFV-jl。利用PCR方法克隆出其主要免疫原性基因B2L和F1L,之后将它们分别定向克隆到真核表达载体pcDNA3.1的多克隆位点BamH Ⅰ和XhoⅠ之间,以及HindⅢ和EcoR Ⅰ之间,经PCR和酶切鉴定,构建出真核表达重组质粒pcDNA3.1-B2L和pcDNA3.1-F1L,之后通过脂质体介导法分别转染MDBK细胞,并用G418进行加压筛选,后经IFA和westem blot方法检测外源基因B2L、F1L的表达情况,结果得到预期大小的蛋白带,表明该重组质粒能够在哺乳动物细胞中较好地表达。

关键词： 羊传染性脓疱病毒 分离鉴定 DNA疫苗 病理组织学观察 免疫组织化学 间接免疫荧光

作者: 赵魁 贺文琦 宋德光 张冰冰 李超 高丰

作者单位: 吉林大学,畜牧兽医学院,吉林,长春 130062 吉林农业大学,动物科技学院,吉林,长春 130062

会议类型: 国内会议

会议名称: 中国畜牧兽医学会兽医病理学分会第十六次、中国病理生理学会动物病理生理专业委员会第十五次学术研讨会

会议地点: 山东泰安

会议语种:中文

页码: 450-457

在线出版日期: 2009-07-01（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）