多重荧光RT-PCR鉴别诊断新型H1N1流感病毒方法的建立及应用

摘要：

从GenBank中获取新型H1Nl流感病毒(Influenza virus)HA和NA基因序列,进行多序列比对之后,设计用于多重荧光RT-PCR的引物和探针,用来建立新型H1N1亚型流感病毒的多重荧光RT-PCR检测方法。两种荧光探针分别标记FAM和CY5荧光基团,淬灭都使用BHQ基团。多重荧光RT-PCR在ABI7500荧光PCR仪上进行,经过40个循环的扩增之后,阳性对照出现标准的S型曲线,并且具有良好的特异性,可以很好地将新型H1N1与传统型H1N1以及H3N2、H5N1、H6N2和H9N2等A型流感病毒区分。多重荧光RT-PCR可以检测到10个拷贝的模板,灵敏度接近检测方法的极限。检测时间短,从加样到反应结束只需要70min。该方法有潜力用于新型H1N1流感病毒的实验室筛查与鉴别诊断。

关键词： 新型H1N1流感病毒 鉴别诊断 荧光探针 灵敏度

作者: 罗宝正 薄清如 徐海聂 沙才华 廖秀云

作者单位: 珠海出入境检验检疫局,国家级外来病检测重点实验室,广东珠海 519015

会议类型: 国内会议

会议名称: 中国畜牧兽医学会兽医病理学分会第十六次、中国病理生理学会动物病理生理专业委员会第十五次学术研讨会

会议地点: 山东泰安

会议语种:中文

页码: 458-460

在线出版日期: 2009-07-01（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）