2型猪链球菌毒力因子gapdh基因的克隆、表达及细胞互作蛋白的初步寻找
2型猪链球菌甘油醛-3-磷酸脱氢酶(glyceraldehyde-3-phosphate dehydrogenase，GAPDH)是一种糖分解酶，负责将磷酸甘油醛GAP磷酸化产生1，3-二磷酸甘油酯DPG，通常存在于细菌胞浆中。细菌表面的多功能GAPDH蛋白可能与细菌毒力密切相关。 本研究以2005年四川分离的2型猪链球菌(SC19)基因组为模板，利用PCR扩增gapdh基因，扩增片段大小为1011 bp。构建了表达质粒pET-gapdh，并成功在大肠杆菌BL21中表达，大小约为41 kDa的融合蛋白GAPDH，与预期结果相符。通过Western blot检测，证实GAPDH具有良好的免疫学活性。应用纯化的GAPDH蛋白，制备了兔抗GAPDH蛋白的多克隆抗体。HeLa细胞是2型猪链球菌感染的模型细胞之一，因此，本研究提取了HeLa细胞的总蛋白，运用配体重叠技术(ligand-ovcrlay approach)，初步寻找到了一个可能与GAPDH蛋白作用的受体蛋白，为进一步研究2型猪链球菌的分子致病机理奠定了的基础。
家畜感染 2型猪链球菌 蛋白抗体 基因表达 细胞互作蛋白 基因克隆
袁芳艳 谭臣 雷丽 陈焕春 贝为成
华中农业大学动物医学院预防兽医学实验室,武汉,湖北,430070
国内会议
武汉
中文
113-114
2009-04-01（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）