牛乳腺炎源金黄色葡萄球菌J9株Fnbp配基结合区基因的原核表达及其免疫原性

摘要：

PCR扩增牛乳腺炎源金黄色葡萄球菌J9株纤粘蛋白结合蛋白(Fnbp)配基结合区基因，纯化后的扩增产物克隆到表达载体pET-28a(+)构建重组表达质粒pET-28a-Fnb，酶切鉴定和测序证明重组质粒构建成功。将pET028a-Fnb转化大肠杆菌BL21经诱导表达得到重组蛋白，Western blot分析证实该蛋白具有良好的免疫学活性。重组蛋白分别与弗氏佐剂、白油佐剂、Seppic佐剂乳化后制备亚单位疫苗，间隔2周共3次腹腔注射免疫小鼠。选取三免后血清抗体效价最高的免疫组血清和小鼠分别进行粘附实验、中性粒细胞吞噬实验和乳腺内金黄色葡萄球菌灌注攻毒实验。结果：三种不同佐剂重组蛋白免疫组中白油佐剂组小鼠血清抗体效价显著高于弗氏佐剂组和Seppic佐剂组(p<0.01)。与对照组相比，重组蛋白免疫组小鼠血清粘附能力和调理中性粒细吞噬能力显著增强(p<0.05)。攻毒后24h重组蛋白免疫组小鼠乳腺金黄色葡萄球菌CFU显著低于对照组(p<0.05)。研究结果表明重组Fnbp配基结合区蛋白有良好的生物学活性和免疫原性，可以作为奶牛金黄色葡萄球菌乳腺炎候选亚单位疫苗。

关键词： 乳腺炎 金黄色葡萄球菌 Fnbp配基结合区 免疫原性r 纤粘蛋白结合蛋白 酶切鉴定 奶牛

作者: 胡长敏 龚瑞 郑露 郭爱珍

作者单位: 华中农业大学农业微生物学国家重点实验室,湖北 武汉 430070 华中农业大学动物医学院,湖北 武汉 430070

会议类型: 国内会议

会议名称: 中国奶业协会第24次繁殖学术年会暨国家奶牛/肉牛产业技术体系第一届全国牛病防治学术研讨会

会议地点: 武汉

会议语种:中文

页码: 264-271

在线出版日期: 2009-08-01（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）