SiRNA特异性沉默高血压相关基因FXYD5及其功能研究
目的:通过RNA干扰(RNAi)技术特异性沉默大鼠高血压相关基因FXYD5的表达,探索该基因在高血压发病机制中的作用。方法:化学合成针对大鼠FXYD5基因的4个特异性siRNA片段(siRNA-1、siRNA-2、siRNA-3、siRNA-4),以含非特异性编码序列的siRNA-con为对照,转染大鼠胸主动脉平滑肌细胞(CRL-1444),通过半定量RT—PCR筛选和real—time PCR定量检测FXYD5的mRNA表达水平,并研究FXYD5基因的特异性沉默对平滑肌细胞增殖效应、迁移力以及细胞膜Na+-K+ATPase活性的影响。结果:siRNA-1和siRNA-2分别使FXYD5的mRNA表达下降93.34％和94.64％,差异有统计学意义；对照组siRNA—con与空白对照组(Blank)FXYD5的mRNA表达差异无统计学意义。各转染组间细胞增殖效应差异无统计学意义,siRNAA-1和siRNA-2转染组平滑肌细胞迁移力低于siRNA—con转染组和空白对照组,差异有统计学意义,siRNA—1和siRNA-2转染组平滑肌细胞-Na+-K+-ATPase活性低于siRNA-con转染组和空白对照组,差异有统计学意义。结论:RNA干扰技术能选择性沉默大鼠胸主动脉平滑肌细胞的FXYD5基因的表达水平,并抑制平滑肌细胞的迁移力和细胞膜的Na+-K+-ATPase活性,初步揭示了FXYD5基因的潜在功能以及在高血压发病机制中可能扮演的角色。FXYD5基因可能是高血压病新的致病相关基因。
高血压 平滑肌细胞 SiRNA特异性 RNA干扰 基因表达
杨德业 施翔翔 来丹丹 高瞻 张敏 黄晓燕 张怀勤
温州医学院附属第一医院心血管内科 温州医学院心血管生物和基因研究所
国内会议
天津
中文
84-89
2009-07-01（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）