茶树脂氧合酶(Cslox1)在酵母中的高效表达及酶学特性研究
茶树脂氧合酶是一种含铁离子的非血红素双加氧酶,在生物体内专一催化含顺,顺-1,4-戊二烯结构的多元不饱和脂肪酸加氧反应,生成具有共轭双键的脂肪酸氢过氧化物(HPOs),并进一步通过酶类的催化生成一系列脂肪族类香气物质。RT-PCR 扩增脂氧合酶lox1 序列,利用基因重组的方法构建可在毕赤酵母分泌型表达系统中表达脂氧合酶的重组表达载体,并转化毕赤酵母得到重组子。在毕赤酵母醇氧化酶AOX1 基因启动子的作用下,重组蛋白得到高效表达,表达蛋白分泌到培养基中,分子量为 98KDa,与氨基酸序列推断的分子量一致;以亚油酸为底物,该酶催化反应最适温度 25℃,最适pH 为3.0;高效液相色谱(SP-HPLC)分析表明该酶催化产物为9-HPOD 和 13-HPOD,二者比率为1:1。
脂氧合酶 茶树 毕赤酵母 酶学特性 高效液相色谱
刘守安 韩宝瑜
中国农业科学院茶叶研究所 杭州 310008
国内会议
重庆
中文
265-273
2009-09-01(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)