猪细胞色素CYP3A29异源表达及其功能活性研究
RT-PCR的方法分离获得猪细胞色素CYP3A29及其辅酶NADPHP450还原酶(NPR)，细胞色素b5(b5)基因cN-DA序列，并构建重组表达载体pFastbacI-CYP3A29，pFastbacI-NPR，pFastbacI-b5.通过重组转座作用获得包含有目的基因的重组病毒粘粒。经转染、优化M()I等过程，CYP3A29，NPR及b5在昆虫细胞sf9中获得功能性共表达。重组表达产物具有典型硝苯地平氧化活性，其动力学参数Km=14.1～25.3μM，与报道的人的重组CYP3A4活性相接近。猪微粒体硝苯地平氧化活性动力学参数Km=29.6～45.2μM，与重组猪CYP3A29和人重组CYP3A4有小量变异。重组表达CYP3A29的硝苯地平氧化活性与猪微粒体硝苯地平氧化活性均可被人类CYP3A4特异的抑制剂酮康唑(KET)和醋竹桃霉素(TAO)强烈抑制。其它人类CYP抑制剂对猪重组CYP3A29和猪微粒体硝苯地平氧化活性表现不同程度抑制作用。本研究细致阐明了猪CYP3A29活性特点，为探索猪CYP3A29蛋白结构与功能的关系奠定基础，为猪用新兽药研发提供参考资料。
猪细胞色素 CYP3A29 硝苯地平 氧化活性 动力学参数
姚敏 戴梦红 陈冬梅 黄玲利 袁宗辉
国家兽药残留基准实验室(HZAU)/农业部食品安全评价重点实验室,国家兽药安全评价实验室,华中农业大学动物医学院,武汉 430070,湖北
国内会议
武汉
中文
111-114
2009-10-23（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）