重复电针预处理通过大麻素CB1受体激活ERK1/2通路诱导脑缺血耐受
目的:研究发现ERK1/2通路参与大麻素CB1受体激活所介导的神经保护作用和抗焦虑作用等效应。研究已经证实电针预处理通过激活CB1受体诱导大鼠脑缺血耐受,且大量研究证实,在缺血和非缺血预处理中诱导脑缺血耐受均有ERK1/2通路参与。故本实验拟观察重复电针预处理是否通过夫麻素CB1受体激活ERK1/2通路从而诱导脑缺血耐受。方法：1.雄性SD大鼠40只,随机分为4纽：Control组(CON组)、电针组(EA组)、AM251(CB1受体拮抗剂)组和AM251+EA组。CON组：行戊巴比妥钠(40mg/kg,i.p.)麻醉;EA组：麻醉后取”百会”穴,选用疏密波、频率2/15Hz、电流强度1mA, 持续电刺激30mm;AM251组：腹腔注射AM251 1mg/kg并麻醉;AM251+EA组：电针前30min腹腔注射AM251 1mg/kg。以上处理重复5天.各组大鼠分别在末次处理后2h和24h行Westernblotting检测脑内ERK1/2磷酸化水平。2.雄性SD大鼠45只,除Sham组,其余分组同上并在未次处理后24h行MCAO, 缺血2h,再灌注2h和24h分别行Western blotting检测脑内ERK1/2磷酸化水平.Sham组大鼠栓线不插入大脑中动脉,其余操作同CON组。3.雄性SD大鼠48只,随机分为6组：Sham组、CON组、EA组、U0126组(：MEK1/2抑制剂),U0126+EA组和DMSO+EA组.Sham组、CON组和EA组的处理同上。U0126+EA组：电针前30min腹腔注射U01260.5mg/kg;DMSO+EA组：电针前30min腹腔注射20％DMSO0.6ml/kg.以上处理重复5天.除sham组,其余大鼠均在最后一次预处理后24h行短暂大脑中动脉阻塞(MCAO)致局灶性脑缺血模型.缺血2h,再灌注24h后行神经功能评分(NFS)和脑梗死容积百分比测量。结果：1.末次EA预处理后2h,EA组p-ERK蛋白表达水平与CON组相比明显增强;AM251+EA纽与EA纽相比p-ERK蛋白表达水平明显降低。末次EA预处理后24h,EA组p-ERK蛋白表达水平与CON纽相比无显著性差异。2.再灌注2h、24h,EA组p-ERK蛋白表达水平与CON组相比明显增强;AM251+EA组与EA组相比p-ERK蛋白表达水平明显降低。3.EA组的NFS明显优于CON组;U0126+EA的NFS与CON组相比无统计学差异。EA组的脑梗死容积百分比明显小于CON组;U0126+EA的脑梗死容积百分比与CON组相比无统计学差异。结论：重复电针预处理可以增强大鼠脑内磷酸化ERK1/2的表达水平;且可以增强缺血再灌注后大鼠脑内磷酸化ERK1/2的表达水平。采用MEK1/2(ERK1/2上游激酶)抑制剂U0126阻断ERK1/2通路激活可以逆转重复电针预处理诱导大鼠脑缺血耐受,说明ERK1/2通路激活参与重复电针预处理诱导大鼠脑缺血耐受。CB1受体拮抗剂AM251可以逆转重复电针预处理所引起的大鼠脑内磷酸化ERK1/2的表达水平增强,说明重复电针预处理诱导ERK1/2通路激活依赖CB1受体。因此推断重复电针预处理通过大麻素CB1受体激活ERK1/2通路从而诱导脑缺血耐受。
缺血再灌注 缺血耐受 神经保护 大麻素 脑缺血 电针预处理
杜鹃 王强 胡博 朱萧玲 赵宁侠 侯丽宏 朱正华 熊利泽 陈绍洋
第四军医大学西京医院麻醉科,西安 710032
国内会议
长沙
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183-189
2009-08-01（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）