肝素酶DNA疫苗经电穿孔免疫在小鼠体内表达和基因组整合研究
本研究利用肌肉注射联合活体电穿孔技术将表达肝素酶基因的裸质粒DNA疫苗导入小鼠体内，间隔1周共免疫8次，不同的免疫时间点获取各主要脏器；提取组织总RNA，以其为模板进行RT—PCR，并且利用实时荧光定量PCR技术考察肝素酶在各组织的表达情况；及质粒本身的生物分布情况。对持续高表达和高分布的组织，利用琼脂糖凝胶分离游离质粒DNA与基因组DNA，考察质粒DNA疫苗是否与基因组发生整合。结果：发现小鼠在肌肉注射联合电穿孔导人人肝素酶质粒瞬时(24小时)和长期(5/8周)，表现出不同的特点。瞬时电穿孔给药，在主要脏器均能检测到质粒的表达和分布，而5周和8周后，仅能在注射部位发现微量的tuRNA表达，在其它器官均无表达；而肝素酶质粒本身在所有的组织均未检测到。本研究提示，电穿孔作为一种基因导入手段在本研究的剂量和操作下是安全、可控、高效的。
实时荧光定量PCR DNA疫苗 肝素酶 电穿孔 生物分布 体内表达 基因组整合
付洁 高新 董周寰 栾好飞 宋海峰
北京放射医学研究所药理与毒理研究室,100850
国内会议
景德镇
中文
220-227
2009-08-01（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）