杨梅果实EST库构建及功能基因分析(摘要)
本文以绿色未成熟、转色初熟、红色成熟、暗红色完熟“荸荠”杨梅果实为试材,应用改良Bugos法提取总RNA,应用polyAT技术分离纯化mRNA,利用LD-PCR技术合成cDNA,经Sfi 1酶切后克隆入pDNR-LIB载体,成功构建了杨梅四个成熟度果实的cDNA文库。文库滴度均达到高质量cDNA文库的滴度标准(10的5次方cfu/ml)。PCR鉴定和测序分析结果表明,文库中杨梅cDNA的插入长度分布范围以300-1000bp为主,占总EST(表达序列标签)数量的92.25%。并分别从四个cDNA文库随机挑取500个克隆进行测序,共获得2000个EST序列,分析表明,共产生395个单基因簇(Unigene)序列,包括301个Singleton(单条序列产生的簇)和94个TCs。
杨梅 Bugos EST库 功能基因 LD-PCR技术 测序分析
徐昌杰 朱长青 高中山 孙崇德 陈昆松
浙江大学果实分予生理与生物技术实验室,农业部园艺植物生长发育与生物技术重点开放实验室,华家池校区,杭州 310029
国内会议
南京
中文
236-237
2009-05-01(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)