九节茶ISSR反应体系的研究
以九节茶叶片提取的基因组DNA为材料,对影响ISSR-PCR扩增效果的一些因素,诸如dNTPs浓度、Taq DNA聚合酶用量、引物用量、模板DNA用量、退火温度以及循环次数等指标进行筛选和优化。结果表明,20μL ISSR反应体系含:10×PCR Buffer、0.4mmol·L-1dNTPs、2U Taq DNA聚合酶、0.6μmol·μL-1引物、5ng模板DNA。PCR扩增程序为:94℃预变性2min,94℃变性30s,44.8℃退火30s,72℃延伸1 min,35个循环,最后72℃延伸7min,置4℃保存。应用该ISSR体系对10份九节茶种质进行了扩增,证实了该体系的适用性和稳定性。
九节茶 ISSR-PCR扩增技术 反应体系 优化技术
郑郁善 黄宇 荣俊冬 陈礼光
福建农林大学 福建省中药材GAP 工程技术研究中心,福建 福州 350002
国内会议
厦门
中文
180-184
2009-09-25(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)