应用噬菌体展示随机肽库筛选与内毒素结合的多肽
目的:从噬菌体展示随机七、十二肽库中筛选能够与内毒素高亲和性结合的多肽序列. 方法:以LPS为靶分子对噬菌体展示随机七、十二肽库进行4轮亲和筛选,获得与LPS结合的噬菌体克隆,应用结合实验和克隆斑抑制实验进一步确证。挑选结合力强的克隆进行DNA测序,推导出呈现的多肽序列,并应用相关软件分析多肽序列,进行蛋白结构数据库和文献数据库检索。 结果:从噬菌体展示随机七、十二肽库中共获得了160个克隆,挑选了19个结合力强的克隆进行DNA序列测定及生物信息学分析。根据插入的DNA序列推导出呈现的多肽命名为P11肽。用此肽序列检索相关数据库发现此结构未被申请专利,体内约908种蛋白与其结构相匹配,其中包含有与LPS相互作用的位点。 结论:通过对噬菌体随机肽库的淘选,获得与LPS结合的多肽。
内毒素结合肽 噬茵体展示随机肽库 基因克隆 DNA序列测定
曹颖
第三军医大学西南医院病理学研究所,重庆 400038
国内会议
洛阳
中文
156-160
2009-06-01(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)