MAGE-1、结核杆菌HSP70与MAGE-3融合基因的构建、原核表达及分离纯化
目的:构建结核杆菌HSP70与肿瘤抗原MAGE-1、MAGE-3的融合基因,在大肠杆菌中进行表达,并进行分离纯化。 方法:通过PCR方法扩增MAGE-3基因片断583-945bp和MAGE-1中间片断280-573bp,依序分别插入TBHSP70基因的3’端和5’端,构建出融合基因原核表达质粒pET28a(+)-MAGE-1-HSP70-MAGB3。含有该质粒的大肠杆菌DH5a进行诱导表达和分离纯化。 结果:成功构建了pET28a(+)-MAGB-1-HSP70-MAGB-3原核表达质粒,含有该质粒的大肠杆菌DH5α经诱导后表达-Mτ 97000的蛋白。经过分离纯化,获得有生物活性的复性融合蛋白。 结论:成功获得了MAGE-1、MAGE-3与TBHSF70的融合蛋白,为其在肿瘤免疫治疗中的相关研究奠定了基础。
肿瘤恶性 免疫治疗 结核杆菌热休克蛋白70 黑色素相关抗原-1 黑色素相关抗原-3 融合基因 原核表达 分离纯化
陈广生 隋延仿 司少艳 胡沛臻 宋宏萍 叶菁 李航 张秀敏 王文勇
第四军医大学西京医院病理科,陕西 西安 710032
国内会议
洛阳
中文
193-198
2009-06-01(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)