地鼠多瘤病毒PCR检测方法的建立与应用
目的：建立地鼠多瘤病毒(HaPY)PCR检测方法并应用于乙脑活疫苗生产过程中地鼠肾细胞的质量控制。 方法：设计针对地鼠多瘤病毒衣壳蛋白VP1片段的特异引物，以含地鼠多瘤病毒(HaPY)VP1片段的质粒PMD19 T-HaPY688为模板进行PCR扩增，对PCR的特异性、敏感度进行检测，并对扩增产物进行Southern blot鉴定及测序确认。应用建立的方法对生产用地鼠肾细胞悬液进行地鼠多瘤病毒DNA的检测。 结果：仅质粒PMD19T-Ha-PY688能够扩增出一条600bp的片段，经Southern blot及测序证明其为地鼠多瘤病毒的特异片段。PCR反应所能检出的最小量为5300DNA拷贝数。7个亚批生产用地鼠肾细胞悬液的HaPY检测结果均为阴性。 结论：建立的PCR方法具有较高的敏感性和良好的特异性，可用于生产用地鼠肾细胞中多瘤病毒感染的检测。
地鼠多瘤病毒 病毒感染 免疫学检验 荧光PCR检测
叶琳 张鹏艳 曾献武 郑庆纹 张雪梅 姚亚夫
成都生物制品研究所,成都,610023
国内会议
贵阳
中文
324-327
2009-10-01（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）