抗EHEC O157：H7 Stx2a1的人鼠杂合Fab噬菌体抗体库的构建及导向筛选
目的：建立人-鼠杂合Fab噬菌体抗体库，筛选抗EHEC O157：H7Stx2a1人源性抗体轻链。 方法：PCR扩增正常人外周血淋巴细胞人抗体全套轻链基因，克隆人含鼠源抗EHEC O157：H7 Stx2a1抗体Fd基因的pComb3X噬粒中，建立人-鼠杂合Fab噬菌体抗体库。通过稀释滴定、限制性酶切等分别对库容、基因重组率和多样性进行鉴定。以M13K07辅助噬菌体超感染，利用纯化的Stx2a1对杂合库进行筛选，对筛出的阳性克隆进行鉴定。 结论：构建了库容量为3.2×10 6CFU、重组率为90％、多样性好的人-鼠杂合噬菌体抗体库。ELISA检测出5个强阳性克隆，Western blot确证其中4个为抗Stx2a1的人-鼠杂合Fab。
医学免疫 噬菌体库 抗体鉴定 基因文库 导向筛选
刘璐 吴剑 曾浩 罗萍 毛旭虎 邹全明
第三军医大学检验系临床微生物及免疫学教研室暨重庆市生物制药工程技术研究中心,重庆,400038
国内会议
贵阳
中文
631-633
2009-10-01（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）