在转化家蚕培养细胞和丝腺组织表达hIGF-Ⅰ
为了实现在家蚕培养细胞和家蚕丝腺组织表达hIGF-Ⅰ基因，以家蚕丝胶基因启动子（Ser-1）驱动人胰岛素样生长因子(hIGF-I)，构建了带有家蚕杆状病毒ie-1启动子控制的neo基因表达盒的转基因载体pigA3GFP-hIGF-ie-neo；在可表达转座酶的辅助质粒存在下，分别转染BmN培养细胞，以700～800μg/mL的G418筛选，获得了稳定转化细胞细胞系;western blotting分析可检测到hIGF-Ⅰ的特异性条带，ELISA检测结果显示，hIGF-I在5×105个细胞中的表达水平约7800pg；通过反向PCR分析表明，在转化细胞中外源DNA可通过随机整合或按照piggyBac特定的转座位点TTAA插入细胞基因组。转基因载体pigA3GFP-hIGF-ie-neo通过精子介导导入蚕卵，利用neo、gfp基因的双重筛选，经过PCR和点杂交鉴定，获得了2条转基因家蚕，ELISA检测结果显示，在G1代hIGF-I在每克中部丝腺组织中的表达水平为2440pg左右。
家蚕 hIGF-Ⅰ基因 转化家蚕细胞 转基因家蚕 胰岛素样生长因子 丝腺组织表达
赵越 李曦 曹广力 薛仁宇 贡成良
苏州大学医学部,苏州 215123
国内会议
陕西杨凌
中文
393-403
2009-05-01（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）