猪脑心肌炎病毒非结构蛋白3AB的原核表达及其单克隆抗体的研制

摘要：

目的：利用原核表达系统表达猪脑心肌炎病毒(EMCV) 非结构蛋白3AB，并通过杂交瘤细胞技术制备其单克隆抗体，为相关研究工作奠定基础。 方法：利用大肠杆菌系统表达具有良好抗原性的重组3AB 蛋白，经包涵体纯化后免疫BALB/c小鼠，取其脾细胞与小鼠骨髓瘤细胞融合，间接 ELISA 筛选阳性的杂交瘤细胞，并结合免疫荧光(IFA)和Weatern Blot对抗体的特异性进行鉴定。 结果：经间接ELISA 筛选阳性的杂交瘤细胞，获得1株能稳定分泌抗3AB 蛋白抗体的杂交瘤细胞株，将其命名为2D12，其亚类测定为IgG1/κ。Western Blot和间接免疫荧光试验证明该单抗能特异性识别3AB 蛋白。 结论：成功获得了针对EMCV-3AB的特异性单抗,为进一步研究猪脑心肌炎病毒非结构蛋白3AB的结构与功能及临床诊断试剂的研发奠定必要的物质基础。

关键词： 猪脑心肌炎病毒 非结构蛋白 原核表达 单克隆抗体 诊断试剂

作者: 沈芳 姜平 李玉峰 李军星 王海燕

作者单位: 南京农业大学农业部动物疫病诊断与免疫重点开放实验室,江苏南京 210095

会议类型: 国内会议

会议名称: 中国畜牧兽医学会动物传染病学分会教学专业委员会第六届第12次学术研讨会

会议地点: 新疆石河子

会议语种:中文

页码: 54-57

在线出版日期: 2008-07-24（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）