传染性胸膜肺炎放线杆菌apxIIC-/kanr+基因缺失减毒株的构建及生物学特性鉴定

摘要：

重组转移载体pBSKA通过电转化导入亲本菌传染性胸膜肺炎放线杆菌血清7型菌(APP-7)WF83株，电转化后的产物涂布于TSB/Kan平板，1-2d可获得突变株。卡那霉素抗性试验证实突变株有卡那霉素抗性；NAD依赖性试验证实突变株依赖NAD生长；PCR鉴定证实了卡那霉素抗性基因置换了apxIIC基因，并证实突变株中无pBSKA质粒的存在；溶血活性试验证实突变株完全失去了溶血活性；细胞毒性试验证实突变株的细胞毒性完全丧失；对小鼠的安全性试验证实突变株的毒力显著减弱，突变株对小鼠是安全的。遗传稳定性试验证实突变株在体外连续传30代或在体内传10代不会发生卡那霉素抗性的丢失。这表明我们所构建的基因缺失减毒株是成功的，为进一步以此突变株作为基因工程弱毒活疫苗株的研究奠定了一定的基础。

关键词： 传染性胸膜肺炎 放线杆菌 重组转移载体 弱毒活疫苗 生物学鉴定

作者: 李建 文心田 曹三杰 黄小波 都启晶 张明 余慧

作者单位: 四川农业大学动物医学院动物传染病与基因芯片实验室,雅安 625014

会议类型: 国内会议

会议名称: 中国畜牧兽医学会动物传染病学分会教学专业委员会第六届第12次学术研讨会

会议地点: 新疆石河子

会议语种:中文

页码: 205-208

在线出版日期: 2008-07-24（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）