真核双顺反子表达载体pcDNA3.1AB的构建与表达
为了构建由双CMV启动子调控的真核双顺反子表达载体pcDNA3.1AB,首先在pcDNA3.1(+)的基础上,构建出pcDNA3.1A和pcDNA3.1B,通过PCR方法扩增pcDNA3.1A上含-PCMV-MCS-BGHpolyA-表达单元的片段,定向克隆入pcDNA3.1B,即得载体pcDNA3.1AB。将DsRed与EGFP基因插入pcDNA3.1AB,分别构建pcDNA-DsRed、pcDNA-EGFP和pcDNA-DsRed-EGFP。质粒转染COS-7细胞瞬时表达,用荧光显微镜进行检测。结果双价质粒pcDNA-DsRed-EGFP能同时表达红色和绿色荧光蛋白基因,两基因表达强度无显著差异,且双价与单价质粒相比荧光蛋白表达强度相当。
真核双顺反子 载体构建 荧光蛋白 质粒转染 启动子调控
邓飞 文心田 曹三杰 黄小波 杨恒
四川农业大学动物医学院动物传染病与基因芯片实验室四川省动物疫病与人类健康重点实验室 四川 雅安 625014
国内会议
中国畜牧兽医学会动物传染病学分会教学专业委员会第六届第12次学术研讨会
新疆石河子
中文
349-352
2008-07-24(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)