Ⅰ型鸭肝炎病毒VP1基因在昆虫细胞中的表达

摘要：

根据DHV-Ⅰ基因组序列设计并合成一对特异性引物，通过RT-PCR方法扩增DHV-Ⅰ(A66株)VP1基因。用限制性内切酶EcoR /HindⅢ消化VP1基因和转移载体pFastbacⅠ，在T4 DNA连接酶作用下将二者连接构建转移质粒pFastbac-VP1。经PCR，双酶切及测序鉴定后将其转化含穿梭载体Bacmd的感受态细胞DH10bac中，蓝白斑筛选获得重组杆状病毒穿梭质粒rBacmid-VP1，在脂质体的介导下转染昆虫细胞Sf9，获得重组杆状病毒rvBac-VP1。SDS-PAGE分析表明，VP1基因在昆虫细胞中获得表达，表达产物分子量约为27KDa.westcm-blot检测表明，表达产物能与抗DHV-Ⅰ阳性血清发生反应，具有良好的反应原性。

关键词： 鸭病毒性肝炎 DHV-Ⅰ病毒 VP1基因 重组杆状病毒 昆虫细胞 真核表达系统

作者: 廖俊伟 尹秀凤 刘大伟 毛火云 胡来根 张小飞

作者单位: 南京天邦生物科技有限公司,江苏,南京 211102 安徽农业大学 动物科技学院,安徽,合肥 230036 南京天邦生物科技有限公司,江苏,南京 211102 安徽农业大学 动物科技学院,安徽,合肥 230036

会议类型: 国内会议

会议名称: 中国畜牧兽医学会动物传染病学分会第十三次学术研讨会

会议地点: 南宁

会议语种:中文

页码: 1172-1175

在线出版日期: 2009-09-01（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）