SYBR Green Ⅰ实时定量荧光PCR检测禽呼肠孤病毒δNS和δC基因方法的建立
为了建立一种方法定量检测禽呼肠孤病毒δNS和δC基因，针对禽呼肠孤病毒δNS、δC基因和管家基因β-actin分别设计了特异性引物，并将PCR扩增的的片段分别连接到pMD18-T载体上，构建的重组质粒分别命名为βactin-pMD18-T、δC-pMD18-T和8NS-pMD18-T。重组质粒经筛选、鉴定纯化后，梯度倍比稀释作为标准品，用于实时定量荧光PCR中禽呼肠孤病毒δNS、δC基因和看家基因β-actin标准曲线的构建。结果表明，建立的方法在1×10(1)-1×10(7)copies/ul模板范围内具有良好的线性关系，相关系数均在0.99以上，至少可检测到10个copies的阳性标准品。该方法具有快速，敏感性高、特异性强和重复性好等特点，能够检测禽呼肠孤病毒δNS和δC基因的表达。
禽呼肠孤病毒 δNS基因 δC基因 SYBR Green I染料法 实时定量荧光PCR检测
熊文婕 谢芝勋 唐熠 谢丽基 刘加波 庞耀姗 邓显文 谢志勤
广西大学 动物科技学院,广西 南宁 530005 广西兽医研究所,广西 南宁 530001
国内会议
南宁
中文
1203-1207
2009-09-01（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）