牛A组轮状病毒VP4全基因的克隆与原核表达

摘要：

以G6型牛轮状病毒总RNA为模板，应用RT.PCR技术扩增牛轮状病毒VP4开放性阅读框，通过T-A克隆技术，将PCR产物克隆至pEASY-T3载体中，成功构建出克隆质粒pEASY-T3-VP4。经双酶切后再将该基因重组于原核表达载体pET32a(+)中，构建出原核表达质粒pET3a-VP4。将pET32a-VP4转化至大肠杆菌BL21(DE3)中，经IgTG诱导和SDS-PAGE分析，可见约108KD的融合蛋白带，即成功构建了能够稳定表达VP4蛋白的基因工程菌株，这为进一步研制牛轮状病毒基因工程疫苗奠定了基础。

关键词： 牛轮状病毒 VP4蛋白 基因克隆 原核表达

作者: 南晓伟 杨少华 高运东 王长法 杨宏军 刘晓 仲跻峰 申之义 何洪彬

作者单位: 山东省农业科学院奶牛研究中心 济南 2501001 内蒙古农业大学 呼和浩特市 010018 山东省农业科学院奶牛研究中心 济南 2501001 内蒙古农业大学 呼和浩特市 010018

会议类型: 国内会议

会议名称: 中国畜牧兽医学会动物传染病学分会第十三次学术研讨会

会议地点: 南宁

会议语种:中文

页码: 1272-1276

在线出版日期: 2009-09-01（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）