流行性乙型脑炎病毒E蛋白可溶性原核表达

摘要：

本研究旨在表达出可溶性流行性乙型脑炎E蛋白，为乙脑的诊断提供抗原。根据GenBank上公布的JEV基因序列，设计带酶切位点的特异性引物，通过RT-PCR方法获得E蛋白基因，将其克隆测序后插入pBCX表达载体。PCR筛选和酶切鉴定后，提取阳性重组质粒转化大肠杆菌BL21(DE3)，经IPTG(0.5mM)诱导后，取样进行SDS-PAGE电泳和western blot分析。结果显示表达的融合蛋白大小为88KD，表达量占菌体蛋白30％，且为绝大部分为可溶。转膜后用化学发光底物显色，在约88KDa位置出现目的条带，说明抗原性较好。表明已成功地表达出该可溶蛋白。

关键词： 流行性乙型脑炎 JEV病毒 E蛋白 基因序列 原核表达 RT-PCR法

作者: 何晓明 林志雄 田纯见 罗琼 谢青梅 毕英佐 马静云

作者单位: 广东出入境检验检疫局检验检疫技术中心,广州,广东,510623 华南农业大学动物科学学院,广州,广东,510642 广东出入境检验检疫局检验检疫技术中心,广州,广东,510623 华南农业大学动物科学学院,广州,广东,510642

会议类型: 国内会议

会议名称: 中国畜牧兽医学会动物传染病学分会第十三次学术研讨会

会议地点: 南宁

会议语种:中文

页码: 1373-1376

在线出版日期: 2009-09-01（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）