激流—灌注式反应器大规模培养Vero细胞工艺研究
Vero细胞是最常见的用于疫苗生产的细胞系，目前普遍采用的培养方式是转瓶培养，但其劳动强度大，易污染，产品质量不易控制。反应器培养Vero细胞以微载体(Cytodex等载体)及NBS公司CellGen310酯片培养为主，培养工艺对设备、技术要求高，一次性投资大，微载体和酯片处理繁琐，耗材价格昂贵，生产成本高。本实验采用一次性激流-灌注式生物反应器大规模培养Vero细胞，通过控制DO、pH等条件，开发出便捷、稳定的大规模培养工艺。种子链扩增采用20ml纸片转管，1×10(7)个细胞接种，培养7天，细胞达到2.3×10(8)个，倍增23倍;将消化下来的细胞接种至220ml纸片转管，培养6天，细胞达到1.5×10(9)个，倍增15倍;将细胞转接至AP20(10L)激流式反应器培养6天，细胞量达到1.6×10(10)个细胞，细胞倍增10倍;细胞消化接种至AP200(100L)反应器培养13天，可收获4.48×10(11)个细胞，细胞倍增30倍，维持期换无血清V001培养液，通过连续灌注培养，维持了24天时间(细胞活力>70％)。本研究为疫苗工业采用大规模细胞培养工艺生产疫苗奠定基础。
Vero细胞 培养工艺 生物反应器 疫苗生产 种子链扩增
宋羚羚 李峦峰 郭芝香 杨凡 孙仁峰 杜春玲 李丽文 惠觅宙
杭州安瑞普生物科技有限公司,杭州 浙江 310019
国内会议
南宁
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1525-1530
2009-09-01（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）