猪繁殖与呼吸障碍综合症临床病毒的分离与鉴定
目的：建立适用于猪繁殖与呼吸综合征病毒PRRSV临床病毒的分离与鉴定方法。并对江西地区的流行毒株进行分离与鉴定。 方法：利用发病猪肺部病变组织悬液接种Marc-145细胞,传代培养,直到出现明显的CPE,收取细胞液并提取细胞液中的总RNA,采用RT-PCR方法,对PRRSV中的目的基因片段特异性扩增,获得的PCR产物测序分析。 结果：发病猪肺部病变组织悬液接种Marc-145细胞培养传代至3代出现明显CPE,通过RT-PCR鉴定后,凝胶电泳结果显示,待鉴定样品与JX1 PRRSV毒株出现大小一致约220 bp的核酸条带,将PCR产物测序分析,通过与NCBI的GenBank数据库中公布的PRRSV美洲型病毒进行比对,具有高度同源性。 结论：实验表明：通过采用Marc-145细胞对待鉴定样品进行分离培养,初步判断待鉴定样品中存在PRRSV病原,同时针对细胞培养物抽提的总RNA采用RT-PCR和PCR扩增产物测序的方法最终确诊待鉴定样品中存在PRRSV病原。
猪繁殖与呼吸综合征 Marc145细胞 病毒检测 基因测序 分离培养 毒株鉴定
张志刚 王远微 郑杰
北京信德威特科技有限公司,北京 100081
国内会议
南宁
中文
299-302
2009-09-01（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）