猪繁殖与呼吸综合征病毒HBKM2株ORF5基因的克隆与原核表达
本研究采用RT-PCR方法扩增了猪繁殖与呼吸综合征病毒临床分离株(HBKM2)的ORF5全基因,并进行了测序分析,根据ORP5的结构特点,进一步扩增了截去N端信号肽序列的ORF5(nsORF5),并将其克隆到pGEX-KG原核表达裁体,构建了重组质粒pKG-ns5,经酶切和测序鉴定后,转化到大肠杆菌BL21(DE3)进行IPTG诱导表达,经SDS-PAGE和Western-blot分析表明：克隆的nsORF5基因与谷胱甘肽转移酶(GST)基因获得了高效融合表达,表达的融合蛋白GST-nsGP5分子量约为43KDa,并具有反应活性。本研究为进一步研究PRRSV GP5蛋白的功能及新型疫苗、血清学诊断方法的研制奠定了基础。
猪繁殖与呼吸综合征病毒 囊膜蛋白 基因克隆 原核表达 ORF5基因
梁望旺 伍锐 杨克礼 刘泽文 熊忠良 段正赢 邓均华 徐涤平
湖北省农业科学院畜牧兽医研究所,武汉 430064
国内会议
南宁
中文
335-338
2009-09-01（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）