检测猪圆环病毒2型血清中和抗体阻断ELISA方法的建立及应用
采用杂交瘤细胞融合技术,获得了一株具有分泌抗猪圆环病毒2型(PCV2)中和活性的单克隆抗体,利用该株单抗建立了一种阻断ELISA方法,用于检测该病毒感染猪血清中和抗体。该方法先用病毒多克隆抗体包被ELISA板以捕获已知病毒抗原,然后与待检猪血清抗体及辣根过氧化物酶标记的单抗进行反应,通过测定酶标单抗显示阻断ELISA检测结果。该方法与常规免疫过氧化物酶单层细胞试验(IPMA)对353份试验猪血清样品进行了平行试验,两种方法检测符合率为96.0％;该方法的敏感性为97.9％,特异性为92.4％,与其它几种猪病毒参考阳性血清无交叉反应。用阻断ELISA和血清中和试验检测PCV2血清中和抗体结果表明,两种方法呈显著正相关性(r=0.9970),其敏感性优于血清中和试验。用阻断ELISA对PCV2灭活疫苗免疫与攻毒试验猪血清样品检测结果显示,疫苗接种2 w开始能够检测到病毒中和抗体,4w后血清抗体阳转率达100％;此外,对来自东北3省不同地区送检的703份血清样品进行检测,抗体阳性检出率为73.4％,表明我国养猪场中PCV2感染率较高,该病毒危害严重。本研究建立的阻断ELISA具有操作简便、特异和敏感等特点,可为PCV2流行病学调查及血清抗体检测提供了一种有效技术手段。
猪圆环病毒2型 血清中和 抗体检测 单克隆抗体 阻断ELISA法
黄立平 刘长明 危艳武 陆月华 郭龙军 温士刚 武嘉男 吴洪丽
中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室,猪传染病研究室,黑龙江哈尔滨 150001
国内会议
南宁
中文
512-518
2009-09-01（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）