抗H3N2亚型猪流感病毒血凝素单克隆抗体的制备与鉴定
采用纯化的H3N2亚型猪流感病毒(SIV)作为免疫原免疫6-8周龄BALB/c小鼠,取免疫小鼠脾细胞与骨髓瘤细胞(SP2/0)融合,用间接ELISA方法筛选分泌抗H3N2亚型SIV的阳性细胞株,经克隆获得7株亲和力较高的杂交瘤细胞株,分别命名为1C9、2C5、2F10、3D3、4E8、5C7、5D12,用其制备的腹水ELISA效价分别为1：105、1：106.1：104、1：105、1：106、1：105、1：106;其中1C9、2C5、2F10、3D3单抗亚类为IgG1,而4E8、5C7、5D12则是IgG2a,所有的单抗轻链均为K型。Wstern-blot结果显示,这7株单抗都能识别HA蛋白,均能分泌针对血凝素的抗体。将本实验室构建的pCAGGS-H3HA质粒转染到293T细胞后,分别用7株单抗进行间接免疫荧光试验,能观察到特异性绿色荧光,证实该7株单抗具有良好的特异性。该亚型单克隆抗体的制备,为SIV鉴别诊断方法的建立奠定了基础。
猪流感病毒 血凝素 单克隆抗体 鉴别诊断 间接免疫荧光试验
孔维 乔传玲 陈艳 杨焕良 展小过 辛晓光 陈化兰
中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医物技术国家重点实验室农业部动物流感重点开放实验室,哈尔滨黑龙江 150001
国内会议
南宁
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631-635
2009-09-01（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）